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DMEM、MEM、F12、1640培養(yǎng)基區(qū)別在哪里?

更新時間:2023-11-11點(diǎn)擊次數(shù):5936

當(dāng)你導(dǎo)師安排養(yǎng)一個沒養(yǎng)過的細(xì)胞,不知道用什么培養(yǎng)基的時候,是否也在為選培養(yǎng)基而苦惱?面對DMEM培養(yǎng)基、MEM培養(yǎng)基、F12培養(yǎng)基、1640培養(yǎng)基等種類繁多的培養(yǎng)基時要怎么選擇呢?

這種時候大家要一起記住:

ü 沒有什么培養(yǎng)條件是jue對正確的;

ü 沒有什么細(xì)胞是咱養(yǎng)不活的;

ü 參考文獻(xiàn)沒有那就不參考了;

ü 反正文獻(xiàn)也不一定是對的;

但如果你的細(xì)胞沒STR鑒定過,沒有親自原代分離過,還各種支原體立克次氏體污染、黑膠蟲污染,那你當(dāng)我沒說。我勸你盡快丟掉!

讓我們先科普下培養(yǎng)基的選擇。

目前合成培養(yǎng)基主要有:

→基礎(chǔ)培養(yǎng)基(常用)

→無血清培養(yǎng)基

→無蛋白培養(yǎng)基

→限定化學(xué)成分培養(yǎng)基

它們對血清添加量的要求各不相同,目前常用的是基礎(chǔ)培養(yǎng)基?;A(chǔ)培養(yǎng)基是細(xì)胞生存的直接環(huán)境,為細(xì)胞生長提供豐富的營養(yǎng)物質(zhì),并能調(diào)節(jié)培養(yǎng)體系的 pH值和滲透壓。因此培養(yǎng)基的質(zhì)量和選擇對于細(xì)胞培養(yǎng)至關(guān)重要。

四種常用培養(yǎng)基的比較:

培養(yǎng)基類型

基本概述

組成成分

適用范圍

應(yīng)用范圍

RPMI-1640 Medium

RPMI-1640廣泛應(yīng)用于哺乳動物、特殊造血細(xì)胞、正?;驉盒栽錾陌准?xì)胞,雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng),是目前應(yīng)用十分廣泛的培養(yǎng)基。

含有還原劑谷胱甘肽、高濃度的維生素,生物素。WEI生素B12以及PABA。

HeLa、JurkatMCF -7 PC12PBMC、星形片質(zhì)細(xì)胞,癌細(xì)胞K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴細(xì)胞、T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞以及HCT-15上皮細(xì)胞等均可參考使用。

尤其適用于懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)。

MEM(Minimum Essential Medium)

也稱最di必需培養(yǎng)基,它僅含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素。成分簡單,可廣泛適應(yīng)各種已建成細(xì)胞系和不同地方的哺乳動物細(xì)胞類型的培養(yǎng)。

僅含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素。

MEM-Alpha一般用于培養(yǎng)一些難培養(yǎng)細(xì)胞類型,而其它沒有特殊之處的細(xì)胞株則幾乎均可采用MEM來培養(yǎng)。HeLaBHK-21 293 T、HEP-2、HT-1080、MCF-7、成纖維細(xì)胞,原代大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞等。

適于各種哺乳動物細(xì)胞的生長。

DMEM高糖(標(biāo)準(zhǔn)型)

DMEM-高糖(標(biāo)準(zhǔn)型) 是一種應(yīng)用十分廣泛的培養(yǎng)基,可用于許多哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng),更適合高密度懸浮細(xì)胞培養(yǎng)。

DMEM培養(yǎng)基 與MEM培養(yǎng)基相比,氨基酸的含量增加了2倍,維生素增加了4倍,同時還增加了非必須氨基酸、微量鐵離子以及丙酮酸鈉氨基酸。

適用于附著性較差,但又不希望它脫離原來生長點(diǎn)的克隆培養(yǎng),也可用于雜交瘤中骨髓瘤細(xì)胞和DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞的培養(yǎng)。原代成纖維細(xì)胞 神經(jīng)元膠質(zhì)細(xì)胞、HUV EC、平滑肌細(xì)胞 HeLa293T、PC-12等細(xì)胞系。

DMEM高糖型:應(yīng)用于生長快、粘附性低的細(xì)胞,雜交瘤的骨髓瘤細(xì)胞、克隆細(xì)胞、DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞、原代病毒宿主細(xì)胞,單一細(xì)胞。

DMEM/

F12

DMEM/F12培養(yǎng)基適于克隆密度的培養(yǎng)。F12培養(yǎng)基成分復(fù)雜,含有多種微量元素,和DMEM以1:1結(jié)合,稱為DMEM/F12培養(yǎng)基(DME/F12medium),作為開發(fā)無血清配方的基礎(chǔ),以利用F12含有較豐富的成分和DMEM含有較高濃度的營養(yǎng)成分為優(yōu)點(diǎn)。

DMEM/F-12 DMEM培養(yǎng)基和Hams F-12培養(yǎng)基的1:1混合物。

該培養(yǎng)基適用于血清含量較低條件下哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)。為了增強(qiáng)該培養(yǎng)基的緩沖能力,改良之一是在DMEM/F12(1:1)中加入15mMHEPES緩沖液。MDCK 神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、人內(nèi)皮細(xì)胞、大鼠成纖維細(xì)胞等。

1.廣泛用于支持多種哺乳動物細(xì)胞的生長;

2.無血清培養(yǎng)基的基礎(chǔ):

3.低血清含量下哺乳動 物細(xì)胞的培養(yǎng)以及克隆密度培養(yǎng)。

一、常見貼壁細(xì)胞培養(yǎng)條件:

1.接種濃度5×10*8個細(xì)胞/L;

2.培養(yǎng)基:MEM或DMEM,胎牛血清濃度:10%-80%;

3.37℃,5%CO2培養(yǎng)箱;

4.起始培養(yǎng)減少震蕩,防止貼壁細(xì)胞脫落。

二、常見懸浮細(xì)胞培養(yǎng)條件:

1.原代培養(yǎng)時盡量去紅;

2.短期培養(yǎng)可選擇添加10%胎牛血清的RPMI 1640;長期培養(yǎng)淋巴細(xì)胞時,要加入細(xì)胞因子;

3.37℃,5%CO2培養(yǎng)箱;

4.每隔3天進(jìn)行半量換液。

本期內(nèi)容:DMEM、MEM、F12、1640培養(yǎng)基區(qū)別在哪里?

下期內(nèi)容:如何讓細(xì)胞“凍"起來?




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