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Vero殘留DNA檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

BlueKit系列Vero殘留DNA檢測(cè)試劑盒是用于定量檢測(cè)各種生物制品的中間品、半成品和成品中Vero宿主細(xì)胞DNA殘留量的專用試劑盒。柏萊源生物為譜新生物代理商,有關(guān)價(jià)格與技術(shù)問題等信息咨詢,請(qǐng)聯(lián)系我們!

產(chǎn)品型號(hào):HG-VE001
更新時(shí)間:2025-12-02
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    Vero 殘留DNA檢測(cè)試劑盒(qPCR-熒光探針法)說明書

號(hào):HG-VE001

Vero殘留DNA檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

Vero 殘留 DNA 檢測(cè)試劑盒是用于定量檢測(cè)各種生物制品的中間品、半成品和成品中 Vero 宿主細(xì)胞 DNA 殘留量的專用試劑盒。本試劑盒利用 TaqMan 熒光探針原理,定量檢測(cè)樣本中 Vero 殘留 DNA。檢測(cè)快速,專一性強(qiáng),性能可靠,最-低檢測(cè)限可以達(dá)到 fg 水平。

試劑盒配套的 Vero DNA 定量參考品,已溯源至國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品。

本試劑盒的檢測(cè)范圍為:3fg/uL~3x105fg/uL。

規(guī)格:

100 Reactions

試劑盒組成:


組分裝量裝量儲(chǔ)存條件
2×qPCR Reaction MIX1.6mL×1管-20℃及以下避光保存
Vero Primer&Probe MIX550μL×1管
定量參考品1(3×10?fg/μL)300μL×1管
定量參考品2(3×10?fg/μL)300μL×1管
定量參考品3(3×103fg/μL)300μL×1管
定量參考品4(3×102fg/μL)300μL×1管
定量參考品5(3×101fg/μL)300μL×1管
定量參考品6(3fg/μL)300μL×1管
DNA稀釋液1mL×3管



規(guī)定儲(chǔ)存條件下 12 個(gè)月。





適用機(jī)型(包括但不限于):

◆ ABl QuantStudio 3 qPCR 儀

◆ 羅氏LC96 Real-Time PCR System

◆ AB1 7500 Real-Time PCR System

◆ 伯樂 CFX Opus96 Real-Time PCR System

◆ 鯤鵬ArchimedTM X Real-Time PCR System

需要準(zhǔn)備的耗材與設(shè)備:

◆熒光定量 PCR 儀

◆ 1000uL,100uL,10uL移液槍

◆ 1.5mL 無(wú)菌離心管

◆ 1000μL,100uL,10μL無(wú)菌低吸附帶濾芯吸頭

◆ 無(wú)菌無(wú)酶八聯(lián)管或 96 孔 qPCR 板

試驗(yàn)流程:

一、 qPCR 反應(yīng)液的制備和加樣

1、根據(jù)所需檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)樣品和待測(cè)樣品數(shù)量(一般做3 組復(fù)孔),計(jì)算反應(yīng)所需孔數(shù):
反應(yīng)孔數(shù)=(6 組參考品+1個(gè)無(wú)模板對(duì)照 NTC+待測(cè)樣品)x3
2、根據(jù)反應(yīng)孔數(shù)計(jì)算本次所需的 Vero qPCR MIX 總量:
Vero qPCRMIX=(反應(yīng)孔數(shù)+2或3)x20uL(2 或
3為操作損失量)
3、將所用試劑置于冰上融化,輕微振蕩混勻,按下表所示配制Vero qPCR MIX:

組分單孔反應(yīng)(μL)
2 x qPCR Reaction MIX15
Vero Primer & Probe MlX5


4.將所需試劑置于冰上融化,輕微振蕩混勻,按下表所示加樣(總體積 30uL):

模板模板量所需qPCR MIX量
參考品參考品1-6各10μL20μL
無(wú)模板對(duì)照NTCDNA稀釋液各10μL20μL
待測(cè)樣品待測(cè)樣品各10μL20μL
5、試驗(yàn)可使用無(wú)菌無(wú)核酸酶的八聯(lián)管或者 96 孔板進(jìn)行反應(yīng),需去除反應(yīng)體系中的氣泡,并離心至管底準(zhǔn)備反應(yīng)。


二、 qPCR 反應(yīng)程序和參數(shù)設(shè)置

以 BIO-RAD 公司 CFX96 qPCR 儀為例。

1、設(shè)置反應(yīng)程序:

2、創(chuàng)建實(shí)驗(yàn)反應(yīng)板,點(diǎn)擊 Select Fluorophores 選擇熒光 FAM;在反應(yīng)板圖表中,選擇樣品孔,在 Sample Type 中下拉選擇 Unknow,勾選熒光 FAM,Target Name 命名為 Vero;輸入每個(gè)樣品的重復(fù)次數(shù)及 Sample Name。

在反應(yīng)板圖表中,選擇標(biāo)曲孔,在 Sample Type 中下拉選擇 Standard,勾選熒光 FAM,Target Name 命名為 Vero;輸入每個(gè)稀釋梯度的重復(fù)次數(shù)及SampleName。并且分別在STD1,STD2,STD3,STD4,STD5,STD6的Concentration 一欄賦值為 300000、30000、3000、300、30、3(單位為fg/uL)。

3、點(diǎn)擊 Run 界面的“Start Run"按鈕進(jìn)行 PCR 測(cè)定。


Stage1污染消化Reps:150℃2min
Stage2預(yù)變性Reps:195℃20s
Stage3循環(huán)反應(yīng)Reps:4095℃3s
60℃30s




程序 Stage3 中 60°C 30s處設(shè)置為熒光收集

三、 qPCR 結(jié)果分析

以BIO-RAD公司CFX96 qPCR儀為例
1. 點(diǎn)擊資料分析視窗Quantitation,可讀取標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率(Slope)、截距(Intercept)、擴(kuò)增效率(Effect)、R2。
2. 在視窗Quantitation Data 中,SQ Mean 一欄可讀取無(wú)模板對(duì)照NTC、NCS、待測(cè)樣本的檢測(cè)值,單位為fg/μL。
3. 陰性對(duì)照 NTC和 NCS 的 CT值都應(yīng)大于標(biāo)曲最-低濃度的 CT值或根據(jù)實(shí)驗(yàn)室自身驗(yàn)證結(jié)果設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)。

注意事項(xiàng):

1. 本試劑盒已通過穩(wěn)定性(凍融等因素)的驗(yàn)證,無(wú)需分裝。

2. 陰性樣品和陽(yáng)性樣品(參考品和待測(cè)樣品等)的配制環(huán)境需區(qū)分區(qū)域,不可在一個(gè)區(qū)域內(nèi)操作,配制人員需穿戴整齊,戴好口罩、手套和穿好潔凈服。

3. 注意在不同加樣步驟間及時(shí)更換吸頭,避免交叉污染,避免長(zhǎng)時(shí)開蓋。

4. 試劑盒必須在有效期內(nèi)使用。

5. 試劑盒內(nèi)所有組分建議在低溫環(huán)境融化后使用。

6. 只有嚴(yán)格遵守說明書的操作方法,全部使用本試劑盒配套的試劑才能保證優(yōu)良檢測(cè)效果。

7. 盡量在當(dāng)天完成樣本前處理純化后立即進(jìn)行后續(xù)qPCR檢測(cè),以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

8. 最終的試驗(yàn)結(jié)果與試劑的有效性、操作者的操作方法及試驗(yàn)環(huán)境密切相關(guān)。

9. 公司只對(duì)試劑盒本身負(fù)責(zé),不對(duì)因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負(fù)責(zé),請(qǐng)使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量,預(yù)留充足的樣本。

10. 本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷。


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柏萊源(天津)生物科技有限公司的優(yōu)勢(shì):

現(xiàn)貨供應(yīng):公司庫(kù)存充足,可快速發(fā)貨,減少用戶等待時(shí)間。

效期保障:嚴(yán)格把控產(chǎn)品質(zhì)量,確保試劑效期新鮮,保障實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。

專業(yè)技術(shù)支持:提供詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案和技術(shù)指導(dǎo),幫助用戶優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,提高實(shí)驗(yàn)成功率。

定制化服務(wù):根據(jù)用戶需求,提供個(gè)性化的產(chǎn)品和服務(wù)解決方案。

售后保障:完善的售后服務(wù)體系,及時(shí)解決用戶在使用過程中遇到的問題。

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